Het Museo Nazionale di San Matteo is gehuisvest in het 13de-eeuwse voormalige Benedictijner klooster van San Matteo. In het Museo Nazionale di San Matteo is een grote verzameling kunstwerken ondergebracht waarbij het accent ligt op beeldhouwkunst uit de Pisaanse school en Toscaanse schilderkunst uit de 12de tot en met de 15de eeuw. Pronkstuk is de collectie 14de- en 15de-eeuwse Pisaanse sculpturen met werken van Nicola Pisano en Donatello. De schilderijencollectie bestaat uit bijna 200 werken uit de Toscaanse school en de schilderijengalerie, een van de belangrijkste ter wereld, herbergt werken van Italiaanse en Europese kunstenaars tot de 18de eeuw. Beroemde werken zijn ‘Madonna van de Melk’ van Nicola Pisano, ‘Madonna van de Nederigheid’ van Gentile van Fabriano en een veelluik van Simone Martini.